ISSN 2410-776X (електронна версія)
ISSN 2410-7751 (друкований варіант)

Ж-л "Biotechnologia Acta" Т. 12, № 6, 2019
С. 56-64, бібліогр. 29, англ.
УДК: 577.21+632.78+57.084.1
https://doi.org/10.15407/biotech12.06.056

СТВОРЕННЯ ВЕКТОРІВ ДЛЯ Agrobacterium-ОПОСЕРЕДКОВАНОЇ ГЕНЕТИЧНОЇ ТРАНСФОРМАЦІЇ РОСЛИН ІЗ ЦІЛЬОВИМ СИНТЕТИЧНИМ ГЕНОМ cry1Ab, ЯКИЙ КОДУЄ СТІЙКІСТЬ ДО ШКІДНИКІВ РЯДУ ЛУСКОКРИЛИХ

А. М. Тараненко¹, І. О. Нітовська¹, Л. Г. Великожон ^1,2, П.Д. Майстров 1, М. В. Кучук¹, Б. В. Моргун^{1, 2}

¹Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАНУ, Київ
²Інститут фізіології рослин і генетики НАНУ, Київ

Метою дослідження було створення генетичних конструкцій для Agrobacterium-опосередкованої трансформації рослин, які містили б синтетичний ген cry1Ab, та їх тестування шляхом трансформації тютюну з подальшим проведенням молекулярно-генетичного аналізу отриманих рослин для підтвердження події трансформації.

Застосовували базові методики клонування ДНК, Agrobacterium-опосередковану трансформацію Nicotiana tabacum L. методом листкових дисків, селекцію трансформантів in vitro, аналіз присутності трансгенів у рослинній ДНК, детекцію експресії гена cry1Ab методом ПЛР зі зворотною транскрипцією. У ході дослідження було сконструйовано вектори рСВ182 і рСВ241 із вмістом синтетичного гена cry1Ab. Створеними векторами здійснено Agrobacterium-опосередковану трансформацію тютюну та отримано рослини-регенеранти, які містили трансгени у своїй ДНК. Підтверджено експресію трансгена cry1Ab в одержаних трансформантах тютюну методом ЗТ-ПЛР. У результаті Agrobacterium-опосередкованої трансформації рослин векторами рСВ182 і рСВ241 із вмістом синтетичного гена cry1Ab стійкості до лускокрилих комах, можна отримувати трансгенні рослини, у яких відбувається експресія трансгена.

Ключові слова: cry1Ab, Nicotiana tabacum L., Agrobacterium-опосередкована трансформація, ПЛР-аналіз, трансгенез.

© Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, 2008