ISSN 2410-7751 (Друкована версія)
ISSN 2410-776X (Електронна версія)
Ж-л "Biotechnologia Acta" Т. 7, № 6, 2014
https://doi.org/10.15407/biotech7.06.051
С. 51-56, Бібліогр. 12, англ.
УДК: 612.419.014.1:612.119
ДУ «Інститут генетичної та регенеративної медицини НАМН», Київ, Україна
Метою роботи було розробити протокол мультипараметричного фенотипування і сортування субпопуляцій гемопоетичних стовбурових LSK-клітин і визначити їх відносний вміст у кістковому мозку мишей.
Досліджено клітини кісткового мозку мишей ліній FVB та розроблено протокол їх мультипараметричного фенотипування, що дало змогу визначити відносний вміст Lin–Sca-1+ c-kit+ (LSK), Lin–Sca-1+c-kit+flt3+CD150–, Lin–Sca-1+c-kit+flt3+CD150+ і Lin–Sca-1+c-kit+flt3–CD150– -субпопуляцій. Встановлено, що домінуюча популяція LSK-клітин має фенотип Lin–Sca-1+c-kit+flt3–CD150– (57,2 ± 6,8%), який характеризує короткоіснуючі гемопоетичні стовбурові клітини, відповідальні за мієлопоез. Вилучення з аналізу клітин, що мають високу ширину сигналу за детекторами прямого і бічного світлорозсіювання, дає можливість зменшити хибнопозитивні результати вимірювань. Запропоновано також протокол і продемонстровано ефективність сортування фракції LSK-клітин кісткового мозку мишей для подальшої трансплантації в експерименті. За повторного фенотипування сортованих клітин чистота фракції Lin–Sca-1+c-kit+ становила 96,6 ± 1,8% зі вмістом життєздатних клітин 89,6 ± 4,6%.
Ключові слова: гемопоетичні стовбурові клітини, мультипараметрична проточна цитометрія, сортування клітин.
© Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, 2014