ISSN 2410-7751 (Print)
ISSN 2410-776X (Online)

Biotechnologia Acta Т. 17, No. 6, 2024
С. 45-55, Бібліограф. 18, анг8л.
УДК: 6:578.834.1:615.28
doi: https://doi.org/10.15407/biotech17.06.045

Повний текст: (PDF, англ.)

БІОТЕХНОЛОГІЧНА СИСТЕМА ДЛЯ ПОШУКУ РЕЧОВИН З ПОТЕНЦІЙНОЮ ДІЄЮ ПРОТИ КОРОНАВІРУСІВ

М.П. Сметюх¹, О.П. Трохименко², С.О. Соловйов ^1,2, І.В. Дзюблик², O.A. Камацький 2, І.В. Савчук ², Н.А. Бобир ³

¹ Київський політехнічний інститут ім. Ігоря Сікорського, Україна
² Національний університет охорони здоров’я України імені П. Л. Шупика, Київ
³ Національний медичний університет імені О.О. Богомольця, Київ, Україна

Мета. Розроблення біотехнологічної системи, в основі якої є штам коронавірусу, який не є патогенним для людини, та чутлива клітинна лінія до обраного штаму, для виявлення сполук із потенційною противірусною активністю.

Методи. Дослідження проводилося на клітинних лініях ФЕК, ФЕКс та ВНК-21, які характеризуються чутливістю до вірусу інфекційного бронхіту курей (IBV). Культивування клітин здійснювали у флаконах та мікропланшетах із адгезивною поверхнею при температурі 37 ⁰С в атмосфері 5% СО₂. Для відділення клітин від поверхні росту застосовували розчин Версена (0,02%), а для трипсинізації ФЕК — розчин трипсину (0,25%). Ростові середовища для всіх культур клітин готували на основі суміші живильних середовищ RPMI-1640 і DMEM у співвідношенні 1:1 з додаванням 5% фетальної сироватки.

Результати. Адаптацію модельного вірусу IBV штаму Н120 до культивування в клітинних культурах ВНК-21 із застосуванням проміжних культур ФЕК і ФЕКс. У клітинах ВНК-21 IBV спричиняв виражену цитопатичну дію і демонстрував високі інфекційні титри, які досягали 5,5 lg ТЦД50/мл. Використання проміжних клітинних культур ФЕК та ФЕКс забезпечило поступову адаптацію вірусу до нових умов культивування завдяки антигенній спорідненості клітин фібробластів ембріонів курки з курячими ембріонами.

Висновки. Вакцинний вірус IBV H120 було успішно адаптовано до умов культивування в перещеплювальних клітинах ВНК-21 за рахунок використання як проміжної системи первинно-трипсинізованих клітин фібробластів ембріону курки. Отримана система «культура клітин ВНК-21 + IBV H120», за умов культивування при 37 ⁰С в атмосфері 5% СО₂ , може бути рекомендована для використання в подальших біотехнологічних, вірусологічних дослідженнях, зокрема для визначення противірусної активності потенційних лікарських засобів по відношенню до коронавірусів.

Ключові слова: коронавірус, IBV H120, ФЕК, ВНК-21, біотехнологічна система, інфекційний титр.

© Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, 2024