ISSN 1995-5537
Ж-л «Біотехнологія» Т. 5, № 4, 2012
С. 74-81, бібл. 24, укр.
УДК 577.152.34:577.151.5
ОПТИМІЗАЦІЯ СЕРЕДОВИЩА ДЛЯ СИНТЕЗУ ФІБРИНОЛІТИЧНОЇ ПЕПТИДАЗИ Bacillus thuringiensis ІМВ В-7324
Н. А. Нідялкова, О. В. Мацелюх, Л. Д. Варбанець
Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К. Заболотного НАН України, Київ
Досліджено умови культивування Bacillus thuringiensis ІМВ В-7324 для біосинтезу пептидази з фібринолітичною активністю. Встановлено, що максимальний синтез ензиму (4,17 од/мг протеїну) відбувається у стаціонарній фазі росту штаму в умовах глибинного культивування. Показано, що для біосинтезу пептидази значущими є всі компоненти базового середовища, крім желатину, вилучення якого призводить до підвищення активності в 4 рази (21 од/мг). Вивчено вплив різних джерел азоту і вуглецю на синтез ензиму. Виявлено, що оптимальними джерелами є сульфат амонію і мальтоза, використання яких дає змогу збільшити вихідну активність у 12 разів (50 од/мг протеїну). За допомогою двофакторного експерименту на чотирьох рівнях було визначено оптимальні концентрації мальтози і сульфату амонію в середовищі, за яких вдалося підвищити фібринолітичну активність у 25 разів (105 од/мг протеїну). Оптимізоване середовище містило (г/л): мальтозу — 19,0, (NH4)2SO4— 12,0, КН2РО4 — 1,6, ZnSO4•7H2O — 0, 25, MgSO4•7H2O — 0,75.
Ключові слова: фібринолітична пептидаза, Bacillus thuringiensis, джерела вуглецю й азоту, двофакторний експеримент.
© Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, 2008