ISSN 1995-5537
Ж-л «Біотехнологія» Т. 4, № 4, 2011
С. 101-103, библ. 8, рос.
УДК 577.151.042: 577.152.311
СПОСІБ ІДЕНТИФІКАЦІЇ БУТИРИЛХОЛІНЕСТЕРАЗИ
ІЗ СИРОВАТКИ КРОВІ КОНЯ
Ю. Г. Жуковський, В. А. Жуковська, Л. П. Кузнєцова, О. Р. Нікітіна, О. О. Сочиліна
Установа Російської Академії наук
«Інститут еволюційної фізіології і біохімії ім. І. М. Сєченова РАН», Санкт-Петербург
Під час промислового виробництва холінестераз в лабораторній практиці іноді виникає необхідність в ідентифікації цих ензимів. Це може бути пов’язано з порушеннями маркування в процесі виробництва ензимів, а також контролю та зберігання готової продукції. Запропоновано спосіб ідентифікації, що дозволяє відрізнити бутирилхолінестеразу із сироватки крові коня від холінестераз з інших біологічних джерел: ацетилхолінестераз — із електричного органа електричного ската і вугра, з еритроцитів верблюда, коня і людини; бутирилхолінестераз — із сироватки крові та мозкової тканини голуба; пропіонілхолінестераз — із сироватки крові та мозкової тканини. Спосіб ґрунтується на різній чутливості холінестеразного домена (каталітичного центру) цих ензимів до двох оборотних фосфонієвих інгібіторів: (С6Н5)3Р+– СН3·I– (1) і (С6Н5)3Р+– СН2СН2СН3·Br– (2). Для кожного ензиму визначають концентрацію інгібітора (С1 для інгібітора-1 і С2 для інгібітора-2), яка зменшує ензиматичну активність у 2 рази, потім обчислюють величину відношення С1/С2. Якщо ця величина більша за 4, можна зробити висновок про те, що ідентифікованим ензимом є бутирилхолінестераза із сироватки крові коня.
.Key words: ацетилхолінестераза, бутирилхолінестераза, пропіонілхолінестераза, фосфонієві інгібітори.
© Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, 2008