- Деталі
- Категорія: 4_2008(en)
- Перегляди: 131
ISSN 1995-5537
Ж-л "Біотехнологія" Т. 1, № 4, 2008
С. 49-56, Бібліогр. 47, англ.
УДК 577.112:616
Науководослідний центр інноваційної онкології Східного госпіталю
Національного онкологічного центру Японії, Kaшівa, Японія
Відділ медицини Джеферсон медичного коледжу Томас Джеферсон Університету,
Філадельфія, США
Ми створили домінантнегативні конструкції кДНК 6-фосфофрукто-2-кінази/фруктозо-2,6-бісфосфатази-3 та -4 (dnPFKFB-3 та dnPFKFB-4) для пригнічення посиленої експресії ендогенних PFKFB-3 та PFKFB-4.
Для цього вводили точкові мутації в АТР-зв’язувальний домен 6-фосфофрукто-2-кінази як PFKFB-3, так і PFKFB-4 кДНК для пригнічення 6-фосфофрукто-2-кіназної активності у продуктах експресії цих конструкцій. Проводили трансфекцію ракових клітин цими домінантнегативними конструкціями для пригнічення експресії ендогенних PFKFB-3 і PFKFB-4 та проліферації клітин. Встановлено, що експресія PFKFB-3 в клітинах карциноми підшлункової залози лінії Panc1, стабільно трансфекованих dnPFKFB-3, знижується як у нормальних умовах, так і за гіпоксії. У клітинах з посиленою експресією dnPFKFB-4 спостерігали пригнічення ендогенних як PFKFB-4, так і PFKFB-3. Проліферація клітин карциноми підшлункової залози, стабільно трансфекованих як dnPFKFB-3, так і dnPFKFB-4, знижується. Результати цих досліджень показують можливість використання домінантнегативних конструкцій PFKFB-3 та PFKFB-4 для зменшення інтенсивності гліколізу та проліферації ракових клітин шляхом зниження експресії ендогенних PFKFB.
Ключові слова: PFKFB-4 мРНК, PFKFB-3 мРНК, домінантнегативні конструкції, ракові клітини.
© Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, 2008