Biotechnologia Acta

...

  • Збільшення розміру шрифта
  • Звичайний розмір шрифта
  • Зменшити розмір шрифта
Home 2017-RSS МУЛЬТИПЛЕКСНА ТАЧДАУН ПЛР ДЛЯ ШВИДКОГО ОДНОЧАСНОГО ВИЯВЛЕННЯ Rhizoctonia cerealis І Rhizoctonia solani О. Грыцев, Ю. Шевченко, Н. Воробьева, Л. Скивка

МУЛЬТИПЛЕКСНА ТАЧДАУН ПЛР ДЛЯ ШВИДКОГО ОДНОЧАСНОГО ВИЯВЛЕННЯ Rhizoctonia cerealis І Rhizoctonia solani О. Грыцев, Ю. Шевченко, Н. Воробьева, Л. Скивка

There are no translations available.

Ж-л "Biotechnologia Acta" Т. 12, № 3, 2019
https://doi.org/10.15407/biotech12.03.075

МУЛЬТИПЛЕКСНА ТАЧДАУН ПЛР ДЛЯ ШВИДКОГО ОДНОЧАСНОГО ВИЯВЛЕННЯ Rhizoctonia cerealis І Rhizoctonia solani

О. Грыцев1, 2, Ю. Шевченко2, Н. Воробьева1, Л. Скивка1

Абстракт

Целью работы было разработать быстрый и чувствительный метод для одновременной идентификации R. cerealis и R. solani на протяжении одной реакции. Чистые культуры фитопатогенных грибов культивировали 5 дней на картофельно-глюкозном агаре при 28 °C, после чего отбирали мицелий и выделяли ДНК с помощью коммерческих тест-систем. Молекулярную идентификацию осуществляли с помощью ПЦР с последующим электрофоретическим разделением продуктов амплификации в агарозном геле. Специфические пары праймеров для области с известной последовательностью: RtubR4/RtubF4 для R. cerealis и ITS1/GMRS–3 для R. solani тестировали относительно их специфичности и возможности использования в мультиплексном варианте ПЦР. Для проверки специфичности праймеров проводили анализ ПЦР с другими фитопатогенными грибами и с ДНК, выделенной из здоровых растений пшеницы. Установлено, что выбранные нами пары праймеров продуцировали единственные специфичные фрагменты R. cerealis и R. solani и не проявляли перекрестной специфичности относительно других фитопатогенных грибов. С помощью градиента температур установлены оптимальные значения температур отжига праймеров. Разработанный нами протокол мультиплексной ПЦР пригоден для одновременной идентификации Rhizoctonia cerealis и Rhizoctonia solani на протяжении одной реакции и может быть использован для диагностики полиэтиологических ризоктониозов.

Полный текст PDF


 

Додаткове меню

Пошук по сайту

Навігація на сайті

Home 2017-RSS МУЛЬТИПЛЕКСНА ТАЧДАУН ПЛР ДЛЯ ШВИДКОГО ОДНОЧАСНОГО ВИЯВЛЕННЯ Rhizoctonia cerealis І Rhizoctonia solani О. Грыцев, Ю. Шевченко, Н. Воробьева, Л. Скивка

Запрошення до співпраці

Пані та понове!  Редакція запрошує Вас публікувати свої роботи на сторінках нашого журналу. © Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, 2008. Усі права захищені. Повний або частковий передрук матеріалів журналу тільки з письмового дозволу редакції.
E
-mail для довідок: biotech@biochem.kiev.ua