Biotechnologia Acta

...

  • Increase font size
  • Default font size
  • Decrease font size
Home 2017-RSS МУЛЬТИПЛЕКСНА ТАЧДАУН ПЛР ДЛЯ ШВИДКОГО ОДНОЧАСНОГО ВИЯВЛЕННЯ Rhizoctonia cerealis І Rhizoctonia solani О. Грыцев, Ю. Шевченко, Н. Воробьева, Л. Скивка

МУЛЬТИПЛЕКСНА ТАЧДАУН ПЛР ДЛЯ ШВИДКОГО ОДНОЧАСНОГО ВИЯВЛЕННЯ Rhizoctonia cerealis І Rhizoctonia solani О. Грыцев, Ю. Шевченко, Н. Воробьева, Л. Скивка

There are no translations available.

Ж-л "Biotechnologia Acta" Т. 12, № 3, 2019
https://doi.org/10.15407/biotech12.03.075

МУЛЬТИПЛЕКСНА ТАЧДАУН ПЛР ДЛЯ ШВИДКОГО ОДНОЧАСНОГО ВИЯВЛЕННЯ Rhizoctonia cerealis І Rhizoctonia solani

О. Грыцев1, 2, Ю. Шевченко2, Н. Воробьева1, Л. Скивка1

Абстракт

Целью работы было разработать быстрый и чувствительный метод для одновременной идентификации R. cerealis и R. solani на протяжении одной реакции. Чистые культуры фитопатогенных грибов культивировали 5 дней на картофельно-глюкозном агаре при 28 °C, после чего отбирали мицелий и выделяли ДНК с помощью коммерческих тест-систем. Молекулярную идентификацию осуществляли с помощью ПЦР с последующим электрофоретическим разделением продуктов амплификации в агарозном геле. Специфические пары праймеров для области с известной последовательностью: RtubR4/RtubF4 для R. cerealis и ITS1/GMRS–3 для R. solani тестировали относительно их специфичности и возможности использования в мультиплексном варианте ПЦР. Для проверки специфичности праймеров проводили анализ ПЦР с другими фитопатогенными грибами и с ДНК, выделенной из здоровых растений пшеницы. Установлено, что выбранные нами пары праймеров продуцировали единственные специфичные фрагменты R. cerealis и R. solani и не проявляли перекрестной специфичности относительно других фитопатогенных грибов. С помощью градиента температур установлены оптимальные значения температур отжига праймеров. Разработанный нами протокол мультиплексной ПЦР пригоден для одновременной идентификации Rhizoctonia cerealis и Rhizoctonia solani на протяжении одной реакции и может быть использован для диагностики полиэтиологических ризоктониозов.

Полный текст PDF


 

Additional menu

Site search

Site navigation

Home 2017-RSS МУЛЬТИПЛЕКСНА ТАЧДАУН ПЛР ДЛЯ ШВИДКОГО ОДНОЧАСНОГО ВИЯВЛЕННЯ Rhizoctonia cerealis І Rhizoctonia solani О. Грыцев, Ю. Шевченко, Н. Воробьева, Л. Скивка

Invitation to cooperation

Dear colleagues, we invite you to publish your articles in our journal.
© Palladin Institute of Biochemistry of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2008.
All rights are reserved. Complete or partial reprint of the journal is possible only with the written permission of the publisher.
E-mail
for information: biotech@biochem.kiev.ua.