Biotechnologia Acta

...

  • Увеличить размер шрифта
  • Размер шрифта по умолчанию
  • Уменьшить размер шрифта
Home Архив 2014 № 1 ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫЕ ВАРИАБЕЛЬНЫЕ ФРАГМЕНТЫ АНТИТЕЛ ПРОТИВ B-СУБЪЕДИНИЦЫ ДИФТЕРИЙНОГО ТОКСИНА, ПОЛУЧЕННЫЕ ИЗ ФАГОВОЙ БИБЛИОТЕКИ АНТИТЕЛ ЧЕЛОВЕКА Олейник Е. С., Кабернюк А. А., Колибо Д. В., Комисаренко С. В.
Печать PDF

ISSN 2410-7751 (Печатная версия)
ISSN 2410-776X (Электронная версия)

Biotechnologia Acta
Т. 7, № 1, 2014


Ж-л "Biotechnologia Acta" Т. 7, № 1, 2014
doi: 10.15407/biotech7.01.054
С. 54-59, библ. 14, рус.
УДК: 577.27:578.81+[616.931:615.279]

ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫЕ ВАРИАБЕЛЬНЫЕ ФРАГМЕНТЫ АНТИТЕЛ ПРОТИВ B-СУБЪЕДИНИЦЫ ДИФТЕРИЙНОГО ТОКСИНА, ПОЛУЧЕННЫЕ ИЗ ФАГОВОЙ БИБЛИОТЕКИ АНТИТЕЛ ЧЕЛОВЕКА

Олейник Е. С., Кабернюк А. А., Колибо Д. В., Комисаренко С. В.

Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины, Киев

Дифтерийный токсин — это экзоантиген Corynebacterium diphtheriae, ингибирующий синтез протеина и убивающий чувствительные клетки. Целью работы было получение одноцепочечных вариабельных фрагментов антител человека (scFv — single-chain variable fragments) против рецепторсвязывающей В-субъединицы дифтерийного токсина.

После трех раундов селекции фаговой наивной (неиммунной) библиотеки против рекомбинантной В-субъединицы были отобраны 12 специфичных клонов. Нуклеотидные последовательности отобранных антител были гидролизированы эндонуклеазой MvaI, при этом выявлено 6 уникальных рестриктных паттернов. Одноцепочечные антитела были экспрессированы в клетках Escherichia coli XL1-blue и методом иммуноблотинга определены в бактериальных экстрактах детекцией антителами к Е-тегу. Методом иммуноэнзимного анализа продемонстрирована способность антител связываться с В-субъединицей токсина, при этом константа аффинности для разных клонов составляла от 106 до 108 М–1.

Поскольку полученные фрагменты антител специфичны к рецепторсвязывающей В-субъединице дифтерийного токсина, целесообразно дальнейшее исследование их токсиннейтрализующих свойств и терапевтического потенциала. Кроме того, полученные scFv-антитела могут быть использованы для детекции и исследования биологических свойств дифтерийного токсина.

Ключевые слов: scFv-антитела, дифтерийный токсин, фаговый дисплей, наивная библиотека рекомбинантных антител человека.

© Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины, 2008

 

Дополнительное меню

Поиск по сайту

Навигация на сайте

Home Архив 2014 № 1 ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫЕ ВАРИАБЕЛЬНЫЕ ФРАГМЕНТЫ АНТИТЕЛ ПРОТИВ B-СУБЪЕДИНИЦЫ ДИФТЕРИЙНОГО ТОКСИНА, ПОЛУЧЕННЫЕ ИЗ ФАГОВОЙ БИБЛИОТЕКИ АНТИТЕЛ ЧЕЛОВЕКА Олейник Е. С., Кабернюк А. А., Колибо Д. В., Комисаренко С. В.

Приглашение к сотрудничеству

Господа! Редакция приглашает Вас публиковать свои работы на страницах нашего журнала. © Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины. Все права защищены. Полная или частичная перепечатка материалов журнала только с письменного разрешения редакции. E-mail для справок: biotech@biochem.kiev.ua


недавно добавлены