Biotechnologia Acta

...

  • Увеличить размер шрифта
  • Размер шрифта по умолчанию
  • Уменьшить размер шрифта
Home Архив 2013 № 6 ПОЛУЧЕНИЕ И АНАЛИЗ МЕТОДОМ IRAP-PCR ТРАНСГЕННЫХ КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ Бавол А. В., Дубровна О. В., Моргун Б. В.
Печать PDF

ISSN 2410-776X (электронная версия),
ISSN 2410-7751 (печатная версия)

Biotechnologia Acta
n. 6, № 6, 2013


Ж-л "Biotechnologia Acta" Т. 6, № 6, 2013
doi: 10.15407/biotech6.06.113
С. 113-119, библ. 28, укр.
УДК: 581.143.6:58.085

ПОЛУЧЕНИЕ И АНАЛИЗ МЕТОДОМ IRAP-PCR ТРАНСГЕННЫХ КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ

Бавол А. В.1, Дубровна О. В.1, Моргун Б. В.2

1Институт физиологии растений и генетики НАН Украины, Киев
2Институт клеточной биологии и генетической инженерии НАН Украины, Киев

Методом биолистической трансформации с использованием каллусных культур из верхушки побега 3-суточных стерильных проростков и векторной конструкции pAHC25, содержащей селективный ген фосфинотрицин-N-ацетилтрансферазы (bar) и репортерный ген ?-глюкуронидазы, получены трансгенные клеточные линии мягкой пшеницы. В исследовании были использованы каллусы 14- и 28-суточного возраста. Отбор устойчивых клеточных линий проводили на среде с фосфинотрицином методами прямой и ступенчатой клеточной селекции. Трансгенный статус полученных форм подтвержден ПЦР-анализом. С применением IRAP ПЦР с праймером к длинным концевым повторам ретротранспозона SIRE 1 у трех трансформированных линий отмечено появление новых, относительно высокомолекулярных (длиной более 1 000 п. н.) ампликонов, что подтверждает транспозицию этого мобильного генетического элемента. Поскольку новые фрагменты ДНК обнаружены у трех из семи исследуемых линий и отсутствовали у контрольного каллуса, это может свидетельствовать, что индукция транспозиции SIRE 1, вероятно, обусловлена геномным стрессом, вызванным встраиванием чужеродной ДНК или непосредственно связанным с процессом трансформации (микроранение, культивирование на селективных средах).

Ключевые слова: мягкая пшеница, биолистическая трансформация, каллусные линии, ретротранспозон SIRE 1, IRAP ПЦР.

© Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины, 2008

 

Дополнительное меню

Поиск по сайту

Навигация на сайте

Home Архив 2013 № 6 ПОЛУЧЕНИЕ И АНАЛИЗ МЕТОДОМ IRAP-PCR ТРАНСГЕННЫХ КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ Бавол А. В., Дубровна О. В., Моргун Б. В.

Приглашение к сотрудничеству

Господа! Редакция приглашает Вас публиковать свои работы на страницах нашего журнала. © Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины. Все права защищены. Полная или частичная перепечатка материалов журнала только с письменного разрешения редакции. E-mail для справок: biotech@biochem.kiev.ua


недавно добавлены