Biotechnologia Acta

...

  • Увеличить размер шрифта
  • Размер шрифта по умолчанию
  • Уменьшить размер шрифта
Home Архив 2013 № 4 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛОКАЛИЗАЦИИ АНТИГЕННЫХ ДЕТЕРМИНАНТ И САЙТОВ ПОЛИМЕРИЗАЦИИ ФИБРИНА ВНУТРИ МОЛЕКУЛ ФИБРИНОГЕНА И ФИБРИНА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В ТЕСТ-СИСТЕМАХ ДИАГНОСТИКИ ТРОМБООБРАЗОВАНИЯ Э. В. Луговской, И. Н. Колесникова,
Печать PDF

ISSN 2410-7751 (Печатная версия)
ISSN 2410-776X (Электронная версия)

Biotechnologia Acta
Т. 6, № 4, 2013

Ж-л "Biotechnologia Acta" Т. 6, № 4, 2013
doi: 10.15407/biotech6.04.033
С. 33-42, библ. 24, англ.
УДК: 547.962.4

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛОКАЛИЗАЦИИ АНТИГЕННЫХ ДЕТЕРМИНАНТ И САЙТОВ ПОЛИМЕРИЗАЦИИ ФИБРИНА ВНУТРИ МОЛЕКУЛ ФИБРИНОГЕНА И ФИБРИНА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В ТЕСТ-СИСТЕМАХ ДИАГНОСТИКИ ТРОМБООБРАЗОВАНИЯ

Э. В. Луговской, И. Н. Колесникова, С. В. Комисаренко

Институт биохимии им. А. В. Палладина  НАН Украины, Киев, Украина

C использованием моноклональных антител было показано, что B?N-регион молекулы фибрина desA (B?1-53) содержит сайт полимеризации, включающий пептидную связь B?14-15, которая принимает участие во второй стадии полимеризации фибрина — латеральной ассоциации протофибрилл. Во фрагменте B?15-53 также обнаружен сайт, названный «C», который вместе с сайтом «А» принимает участие в первой стадии полимеризации — образовании протофибрилл. Создана модель первичного межмолекулярного взаимодействия фибрина. В N-концевой половине ?-цепи D-региона фибрина с применением моноклональных антител II-4d был обнаружен сайт («с»), который принимает участие в построении протофибрилл и, по нашему предположению, комплементарен сайту «C».

Обнаружены две неоантигенные детерминанты, одна из которых экспонируется в суперспиральном фрагменте фибрина B?126-135 в результате отщепления фибринопептидов А от фибриногена тромбином. Изменение пространственной структуры молекулы фибрина, выявленное в этом сайте, необходимо для осуществления последующей латеральной ассоциации протофибрилл. Вторая неоантигенная детерминанта формируется во фрагменте B?134-190 D-димера, образующемся при расщеплении фибрина, стабилизированного FXIIIa, плазмином. Против первой детерминанты получено фибринспецифическое моноклональное антитело FnI-, а против второй — D-димер-специфическое III-3b.

Получены 3 моноклональных антитела против ?С-региона молекулы фибрин(оген)а. С помощью одного из них было экспериментально показано, что ?С-домен соединен с фибринопептидом B в фибриногене и в фибрине desA. Этот домен отходит от остова молекулы после отщепления фибринопептидов B тромбином. Два других моноклональных антитела специфически ингибируют полимеризацию фибрина путем блокировки двух неизвестных сайтов полимеризации в ?С-регионе.

На основе моноклональных антител FnI- и III-3b, используемых в качестве «catch»-антител, и антител II-4d— в качестве «tag»-антител разработаны тест-системы для количественного определения растворимого фибрина и D-димера в плазме крови человека. Эти тест-системы апробированы в клинических испытаниях в Украине. Показано, что для прогнозирования послеоперационных тромботических осложнений, а также для контроля эффективности антитромботической терапии необходимо одновременное количественное определение растворимого фибрина и D-димера до операции и в разные периоды после операции. Только в этом случае можно получить информацию о состоянии баланса между системами свертывания крови и фибринолиза и определить степень угрозы тромбообразования.

Ключевые слова: фибриноген, фибрин, моноклональные антитела, тромбообразование, диагностические тест-системы.

© Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины, 2008

 

Дополнительное меню

Поиск по сайту

Навигация на сайте

Home Архив 2013 № 4 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛОКАЛИЗАЦИИ АНТИГЕННЫХ ДЕТЕРМИНАНТ И САЙТОВ ПОЛИМЕРИЗАЦИИ ФИБРИНА ВНУТРИ МОЛЕКУЛ ФИБРИНОГЕНА И ФИБРИНА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В ТЕСТ-СИСТЕМАХ ДИАГНОСТИКИ ТРОМБООБРАЗОВАНИЯ Э. В. Луговской, И. Н. Колесникова,

Приглашение к сотрудничеству

Господа! Редакция приглашает Вас публиковать свои работы на страницах нашего журнала. © Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины. Все права защищены. Полная или частичная перепечатка материалов журнала только с письменного разрешения редакции. E-mail для справок: biotech@biochem.kiev.ua