ISSN 2410-7751 (друкована версія)
ISSN 2410-776X (электронная версия)
Ж-л "Biotechnologia Acta" Т. 11, № 1, 2018
https://doi.org/10.15407/biotech11.01.058
С. 58-63, бібліогр. 17, англ.
УДК: 576.858
ПОЛІМЕРАЗНА ЛАНЦЮГОВА РЕАКЦІЯ ДЛЯ ІДЕНТИФІКАЦІЇ ВІРУСУ ГЕРПЕСУ КОРОПОВИХ В УКРАЇНІ
Ю. П. Рудь 1, М. І. Майстренко 2, Л. П. Бучацький 2
1 Інститут рибного господарства НААНУ, Київ.
2 ННЦ Інститут біології та медицини, Київський національний університет імені Тараса Шевченка, Україна.
Метою роботи було дослідити хворих риб видів лабео двокольорового (Labeo bicolor) та сома мішкозябрового (Heteropneustes fossilis) тестуванням декількох діагностикумів для виявлення вірусу герпесу та визначення етіології спалахів інфекції серед акваріумних риб у Київському зоопарку влітку 2017 року. Під час досліджень захворювань акваріумних риб у Київському зоопарку знайдено високопатогенний вірус Cyprinid herpesvirus 3 ? CyHV-3 у лабео двокольорового та мішкозябрового сомика. Аналіз інфікованих риб виявив низку уражень, передусім у внутрішніх органах і тканинах. Зябра хворих риб характеризувалися гіперемією та некрозом. У обох видів риб спостерігали порушення структури печінки та зміну її кольору, набряки нирок і крововиливи жовчного міхура. Вірус не репродукувався у перевивних клітинних лініях риб RTG-2, FHM та EPC, про що свідчила відсутність будь-яких морфологічних змін у досліджуваних культурах клітин. В організмі інфікованих риб не було виявлено збудників паразитарних або бактеріальних інфекцій.
Результати досліджень показали, що специфічні олігонуклеотидні праймери до гена тимідинкінази CyHV-3 успішно ампліфікували фрагмент ДНК вірусу. Довжина продукту полімеразної ланцюгової реакції, як і очікували, становила 264 пари нуклеотидів. Ампліфіковані специфічні фрагменти були ідентичні ділянці гена тимідинкінази CyHV-3, як показав аналіз послідовності ДНК. Ідентичність нуклеотидних послідовностей становила 97?99%. Використовуючи як контроль праймери, рекомендовані Міжнародним епізоотичним бюро, було отримано фрагменти розміром 409 і 292, що також свідчило про ідентифікацію CyHV-3. На нашу думку, CyHV-3 потрапив в Україну через нелегальний імпорт акваріумних риб, а також через відсутність належного санітарного контролю під час транскордонних перевезень. Неконтрольоване імпортування акваріумних і культивованих видів риб є серйозною проблемою, оскільки імпортована риба може бути джерелом високопатогенних інфекцій для промислової аквакультури.
Ключові слова: полімеразна ланцюгова реакція, вірус герпесу CyHV-3, лабео двокольоровий, мішкозябровий сомик.
© Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, 2017