ISSN 2410-7751 (Печатный вариант)
ISSN 2410-776X (электронная версия)
Ж-л "Biotechnologia Acta" Т. 13, №5 , 2020
С. 62-72, библиогр. 23, англ.
УДК: 577.112:57.083.3
https://doi.org/10.15407/biotech13.05.062
1Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины, Киев
2Центр крови Национального военно-медицинского клинического центра “Главный военный клинический госпиталь”, Украина, Киев
Тканевой активатор плазминогена (ТАП) — один из ключевых протеинов плазминоген/плазминовой системы, который осуществляет превращение плазминогена в активную протеиназу плазмин. Тромбоциты, с поверхностью которых связываются плазминоген и тканевой активатор, оказывают стимулирующий эффект на реакцию активации. Целью работы было получение поликлональных антител к ТАП, изучение их иммунохимических свойств и исследование взаимодействия тканевого активатора с тромбоцитами методом проточной цитофлуориметрии. Использовали следующие экспериментальные подходы: иммунизация кролика тканевым активатором, получение иммунной антисыворотки, синтез иммуноаффинного сорбента на основе ТАП, иммуноэнзимный анализ (ELISA), проточная цитофлуориметрия. Получены поликлональные моноспецифические антитела к тканевому активатору, характеризующиеся высокой аффинностью к своему антигену (Kd = 4,05・10–9 М). С помощью полученных антител методом проточной цитофлуориметрии показано, что на плазматической мембране неактивированных тромбоцитов есть сайты связывания тканевого активатора, количество которых увеличивается при агонистиндуцированной стимуляции клеток. Выявлены субпопуляции тромбоцитов, отличающиеся по способности связывать на своей поверхности ТАП. Полученные данные имеют важное значение для выяснения механизмов вовлечения тромбоцитов в регуляцию скорости фибринолитического процесса.
Ключевые слова: тканевой активатор плазминогена (ТАП), иммунизация, поликлональные антитела, тромбоциты, проточная цитофлуориметрия.
© Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины, 2020
< Предыдущая | Следующая > |
---|